1. FIJACION: SOLUCION FAA,
TIEMPO: 24 Hrs.
- Alcohol etílico sln 70%---------------------90 mL
- Ácido acetico glacial------------------------5mL
- Formol 37%--------------------------------37 mL
para una fijacion correcta es necesario tomar partes de la planta perfectamente hidratadas y en buen estado.
las partes se llevan a un recipiente lo suficientemente grande como para permitir la flotacion de las mismas previamente cortadas.
2. PROCESO DE INCLUSION:
TIEMPO: 15 Minutos
- Alcohol 50%
- cassette de inclusion
se toman las partes que se sumergieron previamente en el frasco y se cortan nuevamente en dos o tres partes dependiendo del tamaño de la misma.
se separa por parte en cada cassette (ejemplo: 1er cassette: hoja, 2do cassette: tallo) cada parte tiene un cassette diferente, luego de esto se marca y se prosige con la deshidratacion.
3. PROCESO DE DESHIDRATACION: (Alcoholes ascendentes)
- Alcohol 50%---------------------------12 Hrs
- Alcohol 70%---------------------------12 Hrs
- Alcohol 80%--------------------------12 Hrs
- Alcohol 95%--------------------------12 Hrs
los cassettes van siendo rotados por cada uno de los alcoholes en el tiempo determinado.
4. PROCESO DE ACLARAMIENTO:
- 3partes de Alcohol etílico 95% + 1 parte de ter butanol---------12 Hrs.
- Alcohol etílico 50%-------------------------12 Hrs.
- Alcohol etílico + ter butanol-----------------12 Hrs.
- ter butanol-------------------------------12 Hrs.
5.PROCESO DE HIDRATACION
- Alcohol 95% --------------------------12 Hrs.
- Alcohol 80%--------------------------12 Hrs.
- Alcohol 70%--------------------------12 Hrs.
- Alcohol 50%--------------------------12 Hrs.
6. PREPARACION PARA CORTE
- 50% parafina líquida + 50% ter butanol-------6 Hrs.
- 50% parafina pura + 50% ter butanol---------6Hrs.
- parafina pura 56%-------------------------6 Hrs.
se deja en el horno para derretir
- parafina + 30mL de xilol-----------------12 Hrs.
quitar exceso de parafina............................manual
quitar exceso de xilol..................................Alcohol
7. PROCESO DE TINCION
- 1er lavado con H2O corriente
- Solucion con safranina--------------------24 Hrs.
- 2do lavado con H2O corriente
- Alcohol+ gotas de ácido clorhidrico que decolora la muestra.
- Alcohol+ gotas de amonica para neutralizar el decoloro.
- Alcohol 95%
- fast green--------------------------------20 Seg.
- Esencia de clavo.
- Esencia de clavo + etil butanol.
8. PROCESO DE CORTE
- Llevamos el cubo de parafina al microtomo
- Ajustamos la distancia de la cuchilla para obtener cortes muy finos
- Comenzamos a realizar los cortes.
- Montamos en varios porta objetos
- Se coloca el cubre-objetos
- Se etiqueta correctamente
.....Y EL TEJIDO ESTA LISTO PARA SER OBSERVADO.....
